Gran pregunta Tuve que investigar un poco para encontrar un buen ejemplo y elegí la vitamina B1, tiamina. La vitamina se había cristalizado en 1936, por lo que era una gran herramienta para trabajar.
Los investigadores primero produjeron la deficiencia de vitamina en un animal, como las palomas, que desarrollan síntomas clínicos claros. En este caso, uno de los síntomas es un conjunto de trastornos neurológicos.
Las palomas fueron asesinadas y sus cerebros aislados, molidos con tampón para proporcionar un jugo de sus enzimas. El primer paso es ver qué vías metabólicas se efectúan mediante la adición sistemática de materiales de partida. Los investigadores encontraron que la glucosa se podía convertir rápidamente en lactato, pero que el lactato no se oxidaba a dióxido de carbono y agua.
La vía normal para la oxidación de lactato es el ciclo lactato → piruvato → AcCoA → TCA, etc. Encontraron que el bloque es la conversión de piruvato a AcCoA. La adición de tiamina en el extracto celular aceleró esta reacción.
http://www.jbc.org/content/142/1…