¿Por qué algunas de mis zonas de inhibición son más grandes para un agar profundo que para agar superficial en la difusión del disco para las pruebas de sensibilidad a antibióticos?

La inhibición del crecimiento bacteriano mediante el uso de antibióticos se puede estudiar mediante dos métodos básicos

a) Método de taza / pozo de agar

b) método de difusión de disco antibiótico

En el segundo método, creo que la profundidad de la capa de agar no debería afectar la zona de inhibición porque el antibiótico del disco se difunde en su mayoría de forma radial. Sugiero que repita el experimento, mantenga la densidad de bacterias utilizada para todas las placas.

La zona de inhibición se ve afectada por los siguientes factores:

  1. concentración de antibiótico
  2. Cantidad de cultivo bacteriano

Esto ilustra por qué es importante, cuando prueba la sensibilidad a antibióticos o compuestos antimicrobianos, utilizar siempre placas de agar consistentes: vale la pena usar una pipeta estéril o un tubo Falcon estéril para asegurarse de que vierta sus placas siempre de manera uniforme en la misma profundidad (si desea comparar datos entre diferentes placas, o diferentes cepas probadas en diferentes placas, o algo por el estilo.) También puede ser útil, si tiene suficiente de su compuesto de interés, repetir la prueba varias veces. veces, mida la zona de inhibición y mire el promedio.

Hay algunas razones por las cuales puede estar viendo resultados diferentes de un plato a otro. Si las placas “delgadas” son viejas (delgadas porque se han secado un poco), la concentración de todos los nutrientes es diferente y queda menos agua en el plato. Si las placas tienen la misma edad, todavía estamos hablando de las diferencias, desde la placa gruesa hasta la placa delgada, en la cantidad de nutrientes presentes y la tasa de crecimiento de su microorganismo de elección, que puede afectar la susceptibilidad a los antimicrobianos. Si su microbio no está creciendo muy rápido (menos nutrientes), puede ser menos susceptible a la inhibición de la muerte / crecimiento por el compuesto de prueba.