Cómo mostrar la expresión de una proteína de membrana sin etiquetas

Supongo que siempre puedes observarlos en soluciones polares o soluciones no polares. Las proteínas de la membrana son anfipáticas, ya que, en un disolvente polar, el segmento hidrófobo se agregará, probablemente permanezca en la superficie del disolvente. Y debido a que el fragmento hidrofóbico no es coloidal, pueden separarse fácilmente por filtración o centrifugación (supongo). En un tema completamente irrelevante … Debido a la naturaleza anfipática de la proteína de membrana, los científicos a menudo enfrentamos dificultades para cristalizar estas familias de proteínas

Hay demasiadas formas de enumerarlas y esto dependerá de lo que esté haciendo y de cómo lo esté haciendo.

También dependerá de lo que quiere decir con “etiquetas”.

La razón por la que utilizamos la prueba enzima / anticuerpo es porque la especificidad le permite demostrar la presencia de esa proteína, lo cual es mucho más fácil que tratar de descartar cualquier otra proteína que sea similar en tamaño / comportamiento / bioquímica, etc.

En mi laboratorio lo llamamos etiquetado, pero también podría estarse refiriendo a una proteína que ha sido “etiquetada” utilizando isótopos radiactivos, o modificada genéticamente con una secuencia de proteína específica, que también sería “marcar”. Estos son solo dos ejemplos.

Si tienes un anticuerpo, haz inmunofluorescencia o western blot. La citometría de flujo puede ser una opción, pero no tengo experiencia en ese método. De lo contrario, qPCR al menos puede decirle si el ARNm se transcribe.