Hacer tus propios discos de antibióticos, mientras sea posible, puede ser un gran dolor en el … cuello. Te sugiero que uses los discos comerciales.
Si debe hacer sus propios discos, esta forma de hacerlo:
- Utilice el papel de filtro cualitativo Whatman n. ° 1. Utilice un punzón de papel para hacer los discos. Idealmente, deberían tener 6 mm de diámetro
- Esterilice estos discos usando un horno de aire caliente. No use un autoclave: puede terminar empapando los discos húmedos a menos que tenga un ciclo de secado en su autoclave.
- Adquiera un bucle bacteriológico calibrado: esto significa que conoce el volumen exacto que este bucle contendrá. Llamemos a este volumen como v mL.
- Adquiera el antibiótico que desea probar en forma de polvo puro. Esto puede ser … bastante desafiante en muchos países.
- Usando técnicas estériles, disuelva el polvo de antibiótico en agua destilada estéril y logre una concentración tal que v mL de esta solución contenga x microgramos de antibiótico ( x es la fuerza deseada del disco)
- Extienda los discos estériles en un petridish estéril. Esterilice (mediante fuego), enfríe y cargue el circuito calibrado con la solución antibiótica. Toque el bucle cargado en un disco, para que se recoja por acción capilar.
- Coloque este disco en una placa de cultivo ya inoculada con el organismo a analizar.
Puede cortar las esquinas con el procedimiento anterior: puede usar papel de filtro común o soluciones inyectables de antibióticos o simplemente mezclar un volumen conocido de solución de antibióticos con una cantidad conocida de discos y secarlos. Pero esto hará que los resultados sean inexactos, imprecisos y poco confiables.
O bien, puede comprar discos antibióticos comerciales ya hechos. Usualmente uso discos Oxoid ™ o BD ™. Estos son un poco caros (hay marcas menos costosas disponibles), pero uso los resultados para recomendar antibióticos para pacientes y prefiero usar discos de buena calidad.
Cualquiera que sea el método que use, idealmente debe:
- Haga un control de calidad para los discos utilizando cepas estándar de bacterias (disponible comercialmente).
- Siga uno de los estándares para las pruebas e interpretaciones de Kirby-Bauer. Puede elegir entre los estándares CLSI y EUCAST.