¿Es bueno usar una agarosa o gel de SDS a voltaje constante o corriente constante?

El principio es simple. Cuando se aplica voltaje, se genera corriente entre los dos electrodos debido al buffer. Ahora todo depende de lo que contenga tu buffer. Si usa solo agua, se generará una corriente muy baja. Si usa compuestos iónicos como NaCl o KCl, se generará más corriente. Es porque estos iones llevan la corriente a través de los electrodos.

La corriente es directamente proporcional al voltaje aplicado. V = I x R. La resistencia (R) depende de la solución tampón. Algunos búferes tienen baja resistencia y, por lo tanto, generarán más corriente. El agua pura tiene una alta resistencia y generará poca corriente. La alta resistencia también conduce a que se genere más calor. Con el tiempo, la cantidad de corriente generada se reducirá. Si la corriente se mantiene constante, el voltaje aumentará para compensar la reducción en la corriente. Con el tiempo, esto llevará a un aumento de la resistencia y, en consecuencia, a un aumento en la cantidad de calor generado.

En realidad, puede hacer este ejercicio simple de ejecutar el tanque de gel que contiene solo una solución tampón a un voltaje fijo y verificar la cantidad de corriente generada con varios tipos de soluciones, incluso con agua pura. (Pruebe agua desionizada versus agua del grifo).

El voltaje fijo es físicamente más apropiado en experimentos de electroforesis. Use de 10 a 15 V por cm de su gel. Esto proporciona aproximadamente 100 V para geles pequeños y hasta 300 V para grandes. La corriente depende tanto del voltaje como de la resistencia y tiende a variar porque la resistencia aumenta gradualmente durante la electroforesis. El parámetro que realmente le interesa (la velocidad de su migración de macromoléculas) contribuye en una pequeña parte al valor de la corriente, que depende mucho más del buffer que usa. Por lo tanto, al controlar la corriente, realmente no se controla la migración de las proteínas o los ARN.

voltaje constante – para tener una diferencia de potencial constante también conducirá a una corriente constante (ley de Ohm: V = IR). Eso también será cierto para la corriente, pero creo que es más fácil controlar el flujo de su gel a través del control del voltaje.