Cómo calcular el valor de la superóxido dismutasa y el peróxido a partir de los valores de absorbancia obtenidos

Para la actividad SOD, debe calcular:

(1º) el porcentaje máximo de inhibición de la muestra en blanco / minuto: Abs max / min = Absmax (luz) – Absmax (oscuro) / tiempo;

(2º) y de la muestra: Absmuestra / min = Muestra Abs (luz) – Muestra Abs (oscuro) / tiempo;

(3º) Multiplicar los resultados de los pasos 1 y 2: si Absmax / min = 100%, entonces Abs muestra / min = X%

(4º) Inhibición del porcentaje: (I%) = 100 – X%

(5º) Unidad de actividad (UA): se requiere una unidad de actividad para inhibir el 50% de fotorreducción de NBT a formazan azul. Si 50% de fotoreducción = 1 UA, entonces (I%) = Y UA

(6º) Para expresar en mL (UA / mL), corrija el valor de Y a 1 mL de muestra: por ejemplo, si se pipetearon 10 uL, debe multiplicar por 100;

(7º) Para expresar en mg de proteína (UA / mg P), debe dividir el resultado del paso 6 por la concentración de proteína de la muestra.

Para la actividad de POX:

(1º) Muestra deltaAbs480nm = Muestra de Abs480 (tiempo final) – Muestra de Abs480 (tiempo inicial);

Ejemplo: muestra deltaAbs480nm = muestra de Abs480 (120 s) – muestra de Abs480 (20 s) = 100 s

(2º) Corrija el resultado del paso 1 a minuto (Abs480 muestra / min);

(3º) Corrija el resultado del paso 2 a mL (Abs480 muestra / min / mL). Por ejemplo, si se pipetearon 10 uL, multiplicar Abs480 muestra / min por 100;

obs: si la muestra fue diluida, multiplique por factor de dilución

(5º) Unidad de actividad (UA): se requiere una unidad de actividad para cambiar una unidad de absorbancia / mL / min. Entonces, si 1 Abs / mL / min = 1 UA, entonces Abs480 muestra / min / mL = X UA ;

(6º) Para expresar en mg de proteína (UA / mg P), debe dividir el resultado del paso 5 por la concentración de proteína de la muestra.

Oye,

La base para calcular la cantidad de SOD y POD depende de la concentración y los valores de OD (absorbancia).

Cantidad desconocida de POD o SOD = valor / concentración de OD