¿Cómo es un representante de RT-PCR del contenido de ARN en una célula?

RT-PCR, suponiendo que esté trabajando con ARNm, le proporcionará copias de cDNA de cualquier transcripción de ARNm que esté presente en la célula. Eso le dirá qué proteínas se expresan en esa celda en particular en ese momento en particular.

De cualquier forma, la RT-PCR amplificará el ARN basándose en los cebadores que tenga en la muestra. Como mencionó que está tratando de encontrar el contenido de ARN de la célula, me imagino que el ADNc se está amplificando con cebadores tetrámeros aleatorios. Esto dará como resultado que todo el ARN de la muestra se amplifique por igual, estadísticamente hablando, es decir.

Dependiendo de sus condiciones de ciclismo, utilizando cebadores aleatorios, convertirá su ARN en ADNc, y eso se puede usar en alguna otra aplicación posterior, como qPCR o análisis de microarrays.

El ARN extraído será representativo de las células de acuerdo con su etapa (ya sea una célula madre o una adulta, por ejemplo) y su estado (si es fisiológico o patológico o estresante, los ARN expresados ​​pueden variar significativamente en tipo y concentración).

Entonces, después de decir eso, puedes asumir que tu muestra será altamente represantativa de las celdas que recolectas, ya que no se ha realizado una selección superior.

Por supuesto, tenga cuidado con la variación genética que siempre está presente, de hecho, incluso si dos células son completamente similares, en todas sus facetas, aún puede ocurrir la variación genética. De hecho, hoy en día muchos estudios emplean el análisis de células sigle, con el fin de intentar por un lado para estudiar mejor esta variación genética y, por otro lado para tratar de ajustar sus resultados teniendo en cuenta.