¿Qué temperatura es lo suficientemente alta como para romper los enlaces disulfuro de cisteína en las proteínas?

Ese es un enlace covalente, por lo que presumiblemente la temperatura tendría que ser tan alta que también casi rompería los enlaces carbono-carbono y los enlaces carbono-nitrógeno dentro de la estructura del péptido. Si desea romper el enlace disulfuro entre 2 cisteínas, simplemente use un reductor como beta-mercaptoetanol (BME) o ditiotreitol (DTT). El calentamiento en este caso acelerará la reducción. Antes de ejecutar un gel SDS-PAGE, por ejemplo, utiliza tampón Laemmli que contiene 10% de BME (en un stock 4x, por lo que 2.5% cuando se agrega a su muestra) junto con calentamiento 95 * C (o ebullición, como dicen muchas revistas) para 5 ‘antes de cargar. El calor desnaturaliza los enlaces de hidrógeno que contienen hojas beta y hélices alfa, mientras que BME reduce los enlaces disulfuro.