Ese es un enlace covalente, por lo que presumiblemente la temperatura tendría que ser tan alta que también casi rompería los enlaces carbono-carbono y los enlaces carbono-nitrógeno dentro de la estructura del péptido. Si desea romper el enlace disulfuro entre 2 cisteínas, simplemente use un reductor como beta-mercaptoetanol (BME) o ditiotreitol (DTT). El calentamiento en este caso acelerará la reducción. Antes de ejecutar un gel SDS-PAGE, por ejemplo, utiliza tampón Laemmli que contiene 10% de BME (en un stock 4x, por lo que 2.5% cuando se agrega a su muestra) junto con calentamiento 95 * C (o ebullición, como dicen muchas revistas) para 5 ‘antes de cargar. El calor desnaturaliza los enlaces de hidrógeno que contienen hojas beta y hélices alfa, mientras que BME reduce los enlaces disulfuro.
¿Qué temperatura es lo suficientemente alta como para romper los enlaces disulfuro de cisteína en las proteínas?
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