¿Cómo se puede cuantificar los tioles libres en proteínas o péptidos?

Etiquete los tioles libres en condiciones de reducción / desnaturalización con AMS, luego use SDS-PAGE para buscar un cambio de masa de 500 Da por etiqueta incorporada. Si se equilibra en condiciones de oxidación, puede comparar los resultados del etiquetado y calcular potenciales estándar para la formación de enlaces disulfuro también. No funcionará demasiado bien si tu proteína es muy grande.

AMS de Invitrogen:
http://products.invitrogen.com/i …

Ejemplo de aplicación:
http://www.cell.com/abstract/S00 …

Depende de lo que quieres decir con cuantificar. Si desea saber si un grupo tiol es libre o como parte de un enlace disulfuro, puede digerir la proteína en fragmentos con tripsina y utilizar la espectroscopia de masas MALDI-TOF para ver qué fragmentos están unidos. Si el tiol es libre, no debe estar vinculado a ningún otro fragmento. No sé qué tan profundo en bioquímica eres, así que si necesitas algo más explicado, házmelo saber y haré mi mejor esfuerzo. Espero que esto ayude.

Fuente: haciendo esto ahora mismo en mi grupo de investigación para mi tesis de maestría.