El ELISA indirecto se usa principalmente para evitar la síntesis de anticuerpos conjugados con enzimas para cada antígeno, que es bastante caro y complicado.
Los métodos se pueden describir simplemente de la siguiente manera:
ELISA directo
Paso 1. Agregue sus muestras (Antígenos) al pozo y fíjelos para que no se borren más tarde.
Paso 2. Agregue anticuerpo enzimático conjugado a su muestra fija
Paso 3. Y compuesto fluorescente para su muestra, las enzimas que se conjugaron con sus anticuerpos catalizarán el compuesto para producir luz fluorescente.
Paso 4. Analiza las señales fluorescentes
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Sin embargo, los anticuerpos y antígenos se unen específicamente. Por lo tanto, deberá diseñar y fabricar anticuerpos novo conjugados si los disponibles no son adecuados para su estudio.
ELISA indirecto
Paso 1. Agregue sus muestras al pozo y corríjalo.
Paso 2. Agregue el anticuerpo primario (que no está conjugado con otras enzimas)
Paso 3. Agregue el anticuerpo secundario que está conjugado con la enzima.
Paso 4. Agregue el compuesto fluorescente y analice las señales emitidas.
El objetivo de esta práctica es evitar la molestia de requerir una coincidencia uno a uno de anticuerpos conjugados para cada antígeno, ya que todos los anticuerpos primarios consisten en algunas regiones homólogas para que los anticuerpos secundarios se unan.
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