Existen proteínas fluorescentes divididas, pero ¿podemos dividir otras proteínas no fluorescentes también, como las proteínas bacterianas?

Claro, ¡absolutamente! Ayuda tener un poco de conocimiento de las proteínas involucradas, porque eso guiará tu decisión en cuanto a dónde colocar el punto de “división”: el cruce donde tomas un marco de lectura abierto y lo conviertes en dos marcos de lectura abiertos … pero incluso este conocimiento no es realmente necesario, ya que las personas lograron hacer esto de vuelta en el día …

Probablemente el ejemplo más conocido es lo que generalmente se conoce como “complementación alfa”, el uso de un pequeño fragmento del gen de la beta-galactosidasa, expresado en trans, que se asocia con el resto de la proteína beta-galactosidasa y por lo tanto dirige hacia la función enzimática ( Colonias Lac +, o colonias azules en medio que contiene el indicador X-gal) … esta es la base de la mayoría de los sistemas de cribado azul-blanco utilizados en vectores comunes de clonación, véase, por ejemplo, la pantalla blanca azul para más detalles.

Otro ejemplo bien conocido -muy ampliamente utilizado, en parte porque hay un kit disponible comercialmente para comprar- es el sistema bacteriano de dos híbridos (BACTH) que se basa en la reconstitución del producto del gen adenilato ciclasa (cya) cuando dos proteínas asociadas, cada una fusionados a un dominio de la proteína Cya, interactúan entre sí. Esta interacción, por lo tanto, conduce a la actividad Cya que se puede detectar utilizando genes informadores. (ver una revisión que describe la técnica aquí: el sistema bacteriano de dos híbridos basado en la reconstitución de la adenilato ciclasa en Escherichia coli.)