La mayoría de los artículos que he visto han secretado luciferasa de Renilla produciendo alrededor de 3E22 fotones / s / enzima-mol usando coelentrazina nativa. [1] Usando los diversos derivados de coelentrazina, puedes aumentar eso hasta 5E22. [2] Las mutaciones en la enzima de tipo salvaje pueden aumentar la actividad de especificidad 4 veces, específicamente si muta algunas metioninas.
Cambiando a la luciferasa de Gaussia , puedes alcanzar un brillo tan alto como 4.2E24 fotones / s / mol. La parte difícil sobre el uso de Gaussia es la presencia de 10 cisteínas que crean problemas con la producción soluble de alto rendimiento de la proteína activa. [3] Nuevamente, si mudas las metioninas, la actividad cambia. Con Gaussia, su actividad pico cambia pero la semivida de su enzima aumenta drásticamente. [4]
[1] La mutagénesis dirigida por consenso de la luciferasa de Renilla produce una mejor estabilidad y producción de luz.
[2] Coelenterazina, h Coelenterazina y otros análogos
[3] La ingeniería metabólica libre de células promueve la producción de alto nivel de Gaussia princeps luciferasa bioactiva.
[4] Las luciferasas Gaussia mutadas multiplicadas proporcionan una bioluminiscencia prolongada e intensa.
