¿Cómo se realiza la técnica de Brainbow?

1. Mucho de cómo las funciones del cerebro tienen que ver con cómo se conectan las neuronas individuales.
2. Una estrategia para ver cómo se conectan las neuronas es etiquetarlas con diferentes colores.
3. En la técnica de Brainbow, haces animales transgénicos que llevan un cassette de genes fluorescentes en sus cerebros. Este cassette tiene algunas copias de 2-3 genes fluorescentes diferentes. Además, cada copia del gen fluorescente está flanqueada por secuencias de ADN específicas llamadas sitios de recombinación.
4. En presencia de la enzima recombinasa (que también debe introducirse en el animal por vía transgénica), los sitios de recombinación en el casete se emparejan aleatoriamente y hacen que los genes fluorescentes individuales sean volteados o escindidos aleatoriamente.
5. Por lo tanto, las neuronas individuales terminan con diferentes combinaciones de expresión de genes fluorescentes del casete. Por ejemplo, si comienza con un cassette que tiene genes fluorescentes rojos, verdes y azules, tres copias cada uno. Después de voltear y dividir, puede terminar con 2 copias de rojo, 1 copia de azul y 1 copia de verde expresada en una neurona mientras tiene 3 copias de rojo, 2 copias de azul y no se expresa verde en la otra.
6. Hay cientos de diferentes tonos combinatorios de colores que se pueden generar de esta manera usando solo unas pocas proteínas fluorescentes. Por supuesto, tienes muchas más neuronas que eso. Sin embargo, todo lo que necesita es que las neuronas adyacentes terminen con diferentes colores para visualizar su conectividad.