La réplica avanza con un grado extraordinario de fidelidad. En E. coli, se comete un error solo una vez por cada 10 ^ 09 a 10 ^ 10 nucleótidos añadidos. Para el cromosoma E. coli de 4,6 x 10 ^ 6 pb, esto significa que se produce un error solo una vez por cada 1.000 a 10.000 repeticiones. Durante la polimerización, la discriminación entre nucleótidos correctos e incorrectos se basa no solo en los enlaces de hidrógeno que especifican el emparejamiento correcto entre bases complementarias sino también en la geometría común de los pares de bases AUT y GC estándar. El sitio activo de la ADN polimerasa solo acomoda pares de bases con esta geometría. Un nucleótido incorrecto puede formar enlaces de hidrógeno con una base en la plantilla, pero generalmente no encajará en el sitio activo. Las bases incorrectas pueden rechazarse antes de que se forme el enlace fosfodiéster. La precisión de la reacción de polimerización en sí misma, sin embargo, es insuficiente para tener en cuenta el alto grado de fidelidad en la replicación. Las cuidadosas mediciones in vitro han demostrado que las ADN polimerasas insertan un nucleótido incorrecto por cada 10 ^ 4 a 10 ^ 5 errores correctos. Estos errores a veces ocurren porque una base se encuentra brevemente en una forma tautomérica inusual, lo que le permite formar enlaces de hidrógeno con una pareja incorrecta. In vivo, la tasa de error se reduce mediante mecanismos enzimáticos adicionales. Un mecanismo intrínseco a prácticamente todas las ADN polimerasas es una actividad de exonucleasa 3′-5 ‘separada que comprueba dos veces cada nucleótido después de que se agrega. Esta actividad de nucleasa permite que la enzima elimine un nucleótido recién agregado y es altamente específica para pares de bases mal emparejados. Si la polimerasa ha añadido el nucleótido incorrecto, se inhibe la translocación de la enzima a la posición en la que se va a añadir el siguiente nucleótido. Esta pausa cinética brinda la oportunidad de una corrección. La actividad de la 3’-5’exonucleasa elimina el nucleótido mal apareado, y la polimerasa comienza de nuevo. Esta actividad, conocida como revisión, no es simplemente el reverso de la reacción de polimerización, porque el pirofosfato no está involucrado. Las actividades de polimerización y corrección de una ADN polimerasa pueden medirse por separado. La corrección de pruebas mejora la precisión inherente de la reacción de polimerización de 10 ^ 2 a 10 ^ 3 veces. En la ADN polimerasa monomérica I, las actividades de polimerización y revisión tienen sitios activos separados dentro del mismo polipéptido. Cuando se combinan la selección de bases y la corrección de pruebas, la ADN polimerasa deja un error neto por cada 10 ^ 6 a 10 ^ 8 bases añadidas. Sin embargo, la precisión medida de la replicación en E. coli es aún mayor. La precisión adicional es proporcionada por un sistema enzimático separado que repara los pares de bases no coincidentes que quedan después de la replicación.
-Fuente: Principios de Bioquímica, Lehninger