Hay muchas marcas y configuraciones para lanzar geles, por lo que puede que no haya una técnica que abarque todo.
Pero una vez trabajé brevemente en un laboratorio afortunado donde había un estudiante trabajador que limpiaba y también echaba geles para todos. Tenía una técnica muy elegante para evitar fugas en la configuración de Biorad, donde las fugas desde el fondo son muy comunes. Ella siempre logró hacer que funcione, incluso con platos ligeramente astillados. Por lo general, hizo el gel separador y sacó una pequeña alícuota. Agregaría un poco de APS y TEMED a esto y agregaría una cantidad muy pequeña a todas las placas (por lo general hasta 20 a la vez) que ella había dispuesto. Fugas o sin fugas, una pequeña cantidad se mantendrá en la parte inferior por acción capilar. Esto solidificaría y sellaría todas las filtraciones. Esto funciona en la configuración de BioRad, no funciona con la de mi laboratorio ahora (usa una junta de algún tipo para sellar, esto aún puede filtrarse por los lados.
Cómo hacer un gel SDS-PAGE para Western blots sin fugas
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Suponiendo que sus proporciones de APS, TEMED, acrilamida estén en su lugar, puede probar este consejo.
Después de haber sellado los lados y el fondo con agar, puede llenar cuidadosamente el espacio entre las placas con un poco de agua destilada. Asegúrese de que el aparato esté seco de antemano. Después de 5 minutos, verifique si se ha filtrado el agua. De lo contrario, drene el agua invirtiendo el aparato y estará listo para usar el gel de fundición. Si hay alguna fuga, vuelva a hacer todo el sellado. Puede consumir un poco de tiempo, pero al final obtendrá un gel adecuado sin desperdiciar los costosos reactivos.
Si prueba esto, dígale si funcionó para su = D.
¡Buena suerte!
Asegúrese de que no haya problemas de sellado o placas rotas, y podría considerar un gel más grueso.
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Haga coincidir las muescas en las placas gruesas con las del electrodo. La muesca de la placa gruesa debería encajar exactamente debajo de la muesca del electrodo. Haz esto y no se escapará!
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