Cuando se usan cloruro férrico o sales metálicas similares para coagular proteínas, ¿pueden las proteínas ser fácilmente solubilizadas?

La precipitación con sulfato de amonio es relativamente barata, pero la concentración de sal necesaria para precipitar su proteína debe determinarse empíricamente y puede ser MUY alta (1 M +). La pastilla que sacas es una perra para resolubilizar y casi seguramente requerirá grandes cantidades de urea.

No sé demasiado sobre los coagulantes de cloruro férrico, pero parece que pueden ser difíciles de revertir una vez precipitados. Por lo general, se utilizan en los protocolos de tratamiento de agua, y parece que no se ha prestado mucha atención a cómo revertir la coagulación. De nuevo, es probable que tenga que usar urea para resolubilizar, lo que definitivamente interferirá con una gran cantidad de posibles aplicaciones posteriores.

Dependiendo de su báscula y del equipo que tenga disponible, la forma más confiable y barata de concentrar (presumiblemente pura) proteína sin ningún problema de resuspensión es diálisis forzada, similar a la ósmosis inversa, casi. Todo lo que necesitaría es una pieza robusta de membrana de diálisis a la que su proteína no le quede bien y un método para forzar el líquido a través de la membrana mientras se mantiene la mezcla de proteínas. He visto aparatos para esto que usan una corriente de nitrógeno para mantener la presión y pueden manejar hasta unos cientos de mililitros, pero no sé si estarán disponibles en una escala de proceso.

Las proteínas no van a resolubilizarse fácilmente. Supongo que desea recuperar la actividad y utilizar el método de salazón para concentrarse fácilmente. La urea se puede utilizar para desplegar la proteína una vez que se han precipitado y luego se han dializado, pero es probable que no obtenga mucha actividad. Las proteínas, especialmente las eucariotas, dependen de los péptidos chaperones para ayudar a doblarlos en su forma correcta. Si está buscando concentrar una solución de proteínas, recomendaría la diálisis del caldo de fermentación o los filtros de corte de peso molecular (MWCO). Esto supone que no tiene acceso a FPLC ni a ningún otro equipo más adecuado para la purificación de proteínas.