ADN monocatenario útil, para usar en algo así como una sonda in situ o un oligo personalizado, puede prepararse con una única reacción de PCR cebada. Si desea controlar la longitud, asegúrese de que la única entrada sea ADN de longitud conocida, o puede controlar aproximadamente el tamaño según el tiempo de reacción. Al final puedes digerir el ADN bicatenario. He hecho esto para hacer sondas de ADNss para in situ (tienen algunas ventajas sobre las sondas de ARN). Aquí hay un enlace para hacer las sondas de ADNds marcadas con DIG: sondas de ADNss derivadas de PCR para la hibridación fluorescente in situ al ARN del VIH-1. Aquí hay un enlace a un papel que fabrica sondas de ADNmc radiomarcadas: Síntesis de sondas de ADN derivadas de PCR, monocatenarias, adecuadas para la hibridación in situ. Usan algunos trucos para deshacerse de uno encallado por la fosforilación del cebador.
¿Cómo se obtiene el ADN monocatenario?
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¿Cuáles son ejemplos de enzimas de ADN?
¿Por qué el ADN sufre desnaturalización y renaturalización?
¿Pueden las proteínas convertirse en ARN y ADN?
¿Cuáles son las explicaciones más plausibles para la polaridad en la embriogénesis?
La respuesta más simple: calentando el ADN bicatenario. A diferencia del ARN, el ADN casi siempre se encuentra en la forma de doble cadena. El ARN generalmente es monocatenario, pero a menudo se dobla sobre sí mismo para formar una doble hélice.
El ADN de calentamiento lo desnaturaliza y rompe los enlaces de hidrógeno entre los pares de bases, dando 2 cadenas simples.
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