Cómo confirmar que la colonia en PDA acidificada es una levadura y no una bacteria

Una mirada rápida bajo un microscopio de luz estándar debería hacerlo: tome una pequeña cantidad de células de la colonia usando una punta de pipeta estéril o un bucle inoculante, gírelo alrededor en ~ 10 l de agua estéril en un portaobjetos de microscopio para resuspender las células, y abre un cubreobjetos en la parte superior.

Las levaduras generalmente son mucho, mucho más grandes que las células bacterianas. Si no tienes mucha experiencia con mirarlas bajo el microscopio, prepara en paralelo algunas muestras de cepas bacterianas o de levadura confirmadas y míralos bajo el mismo microscopio.

Dependiendo de qué tipo de levadura tenga y cómo ha estado creciendo, es posible que pueda ver algunas células en gemación características bajo el microscopio. Wikipedia tiene una buena imagen de ellas aquí, foto superior: Saccharomyces cerevisiae. Sin embargo, no todas las levaduras crecen por gemación, por lo que no necesariamente esperamos ver esto.

(Obviamente hay formas más sofisticadas de identificar su colonia, secuenciando el gen 18S, PCR para amplificar algunos genes específicos de especie, etc., pero todos requieren más tiempo y son más caros que una mirada rápida bajo el microscopio).

Las células de levadura son más grandes y se observan fácilmente incluso con un objetivo 40x. El brote también es fácil de observar en la mayoría de las levaduras, pero tenga en cuenta que también es posible la fisión binaria (p. Ej., Schizosaccharomyces ) o la formación de pseudomicelias. Algunos hongos también forman colonias que resemblan levaduras (por ejemplo, Aureobasidium ) pero las hifas o conidióforos se pueden ver bajo el microscopio. Por lo general, la microscopía UV revela cicatrices de protuberancias prevoias. Pero el tamaño de la mayoría de las células bacterianas es mucho más pequeño que la mayoría de las levaduras y es la característica de diagnóstico más común para identificarlas fácilmente.

Si las células tienen un núcleo, entonces sabes que son levaduras y no bacterias. En general, la levadura será más grande, de forma más ovalada y en ciernes. Las bacterias serán varillas, hélices o círculos en forma, y ​​generalmente serán más pequeños. Obviamente hay muchas diferencias si comparas colonias de levaduras y bacterias, pero si solo tienes una colonia para mirar, el núcleo es probablemente tu mejor opción, ya que te dirá con certeza que no es una bacteria.