¿Es importante crear un grupo de control negativo en la transformación del plásmido si se usan dos enzimas de restricción? ¿Por qué?

¿Importante? En realidad no.

A menudo experimento resultados inesperados mientras hago controles. Lo más sorprendente fue tener dos veces los transformantes en la placa de control y, a pesar de ello, observar casi el 100% de positivos en la placa de recombinación.

También sucedió que la placa de control estaba prometedoramente vacía, pero el examen de las colonias sobre el recombinante arrojó solo resultados negativos.

La predicción ingenua de que # positivos = #colonias en rec. plate – #colonies on ctrl plates rara vez se confirma.

Podemos especular sobre las razones. Pero también eso no te lleva más allá de la simple observación empírica de que los controles de la ligadura no son explícitos.