Las técnicas de tinción en microbiología se basan en las interacciones iónicas entre los reactivos de tinción y las estructuras bacterianas.
La cápsula bacteriana es de naturaleza no iónica. Tiene muy baja afinidad por la mancha. Por lo tanto, no se mancha fácilmente. Al usar el método de tinción negativo, la demostración de la cápsula es más fácil. En tinción negativa, el fondo y la celda están manchados.
Protocolo y Principio de la tinción de la cápsula por el Método de Manewal.
- Tome una gota de rojo Congo (mancha A de Manewal) en una diapositiva.
- Mezcle un ciclo de cultivo bacteriano.
- Prepara suavemente una mancha delgada.
- Permita que el frotis se seque al aire, no lo caliente.
- Añada tinción de Manewal B. (Esta tinción se prepara con FeCl3 al 10% – actúa como fijador, Fuchin ácido – tiñe la célula, 5% de fenol – aumenta el poder de penetración de fuchin ácido y ácido acético – disminuye el pH del frotis) .
- Mantenlo por 5 min.
- Drene la mancha de acceso, seque el portaobjetos al aire y observe debajo del objetivo de inmersión en aceite.
- Cell tomará la mancha fuchin ácida de Manewal’s Stain B y aparecerá en rojo.
- La cápsula tiene baja afinidad por la mancha por lo que aparecerá incoloro.
- El fondo que se tiñó con rojo Congo aparecerá azul debido al cambio en el pH del frotis después de la adición de la tinción de Manewal B.
