¿Las líneas celulares de cáncer de investigación acumulan suficientes mutaciones que las hacen no más comparables al realizar las pruebas?

A2A. Una pregunta y preocupación relevante.

Sí, las líneas celulares de humanos (o roedores hechos para tener tumores similares a los humanos) cambian rápidamente y de manera estocástica, en la cultura. Tanto las condiciones in vivo como in vitro promueven el estrés, aunque los medios no son mutuamente excluyentes.

La línea de células HeLa en la mayoría de las incubadoras de laboratorio hoy en día se ve, genéticamente, bastante diferente de las derivadas de Henrietta (aunque se puede intentar minimizar esto obteniendo las semillas finas de vino en almacenamiento congelado).

Pero, ¿qué importa realmente aquí? Depende de lo que quieras aprender o probar. La mayoría de las células básicas y la biología de las células cancerosas se aprenden sin el uso de líneas celulares humanas neoplásicas. Esto es por la sencilla razón que implica: no aprenderá nada mecánico al ver crecer las malas hierbas; más bien, es más instructivo determinar de dónde vino la hierba.

Sin embargo, las líneas celulares agresivas bajo presiones selectivas son útiles para fines de ingeniería o farmacológicos. Por ejemplo, ¿qué cosas matarán o arrestarán a una hierba que crece rápidamente? ¿Hay algún punto de estrangulamiento común que las células invasoras tienden a conducir para satisfacer sus necesidades de crecimiento? ¿Aparecen mutaciones que están relacionadas con el estrés / entorno local en el que la célula necesita sobrevivir? Aunque no pertenezco a esta categoría, mi favorito es: mezclemos estas dos o tres cosas juntas y / o dosifiquemos en diferentes horarios para ver si mata cosas.

Si le interesan los estudios de metástasis, el proceso general o cómo prevenirlo, entonces es mejor usar modelos de línea celular que sean más metastásicos / invasivos.

Por último, ¿qué quieres comparar? Nunca compararía una línea humana agresiva en cultivo a partir de un tumor en estadio 3/4, con una línea humana primaria de tipo salvaje, del mismo tejido, que expresa un oncogén prototípico. No estoy seguro de que ningún científico que valga la pena haga esto tampoco. Si lo hacen, probablemente haya un punto simple que hacer: uno no trata la hierba de la misma manera que uno trata la hierba. Trate la hierba con X y trate la hierba con Y.

Ellos si. Esa es una pregunta muy válida. Una línea celular es una versión inmortalizada de células cancerosas que originalmente se obtuvieron de un paciente. Durante nuestra investigación, hay dos factores principales que aumentan la mutación de las células cancerosas. En primer lugar, es el momento en que cultivas las células. A medida que las células experimentan división múltiple, inevitablemente acumulan más mutaciones. En segundo lugar, es la metodología del método de cultivo. Cuando subcultivamos las células, tomamos una muestra de lo que está en el matraz confluente y luego lo siembramos en un matraz nuevo. Luego descartamos el resto. Si hace esto muchas veces, incluso si se trata de una muestra, es probable que haya cambios en las celdas en comparación con el matraz original donde descongeló la línea de la celda por primera vez. Habrá una subpoblación de células cancerígenas dentro de la muestra que crecerá más rápido que el resto y eventualmente se convertirá en la subpoblación dominante, lo que cambiará su línea celular, digamos, 10 pasos hacia el futuro.

Por lo tanto, es común que después de una serie de pasos por el camino, los investigadores tiran todo el matraz y regresan a su stock de células de paso temprano que se congelaron cuando compraron la línea celular por primera vez. Los investigadores también están interesados ​​en observar el tiempo de duplicación, el tiempo de adherencia y la morfología, que son signos reveladores del cambio en la línea celular. Los investigadores también realizan periódicamente citometría de flujo para verificar el cambio de expresión de marcador de superficie también. Estas son las precauciones comunes para aumentar la reproducibilidad.

Sin embargo, en el futuro, las células primarias derivadas de los pacientes son mucho más valiosas ya que cada tumor es diferente y el efecto del tratamiento es diferente. Entonces, si el efecto del tratamiento puede funcionar para un gran porcentaje de personas, es mucho más valioso en comparación con tener una eficacia del 100% en una línea celular. Una línea celular no es más que un trampolín hacia lo desconocido, donde la variabilidad interindividual es tu mayor némesis.

Las líneas celulares de cáncer tienen desafíos moleculares similares que se asocian con la heterogeneidad molecular intratumoral en muestras de cáncer.

Además, la frecuencia de las mutaciones, la tecnología, las muestras de cáncer, el control de calidad y la correlación deben realizarse con un análisis en profundidad del tipo de cáncer y la terapéutica en curso junto con algunas vías que pueden persistir.

Los artefactos y la amplificación en muestras de bajo número de copias y el tamaño del fragmento se convierten en características de importación para ayudar a obtener resultados de prueba comparables deseados.

Ojalá ayude