La mayoría de las enzimas son proteínas. Hay excepciones pero ignoraremos eso para esta respuesta. La concentración de proteína se puede estimar de muchas maneras.
- Ensayo Bradford (1): usa colorante Coommassie que se une a residuos específicos en la proteína y da absorbancia a 595 nm. Su rango es de aproximadamente 2-10 ug para 1 ml de reactivo de Bradford.
- Ensayo de Folin-Lowry (2): es un método más antiguo y consume más tiempo que el ensayo de Bradford. Tiene un rango de alrededor de 0.01-1 mg / ml de proteína.
- Absorbancia a 280 nm. Los residuos aromáticos en una proteína se absorben a 280 nm y el coeficiente de extinción molar teórico de las proteínas se puede calcular basándose en su secuencia de aminoácidos aquí.
Existen otros métodos con los populares mencionados anteriormente.
Referencias
(1) Bradford, MM. Un método rápido y sensible para la cuantificación de cantidades de microgramos de proteína que utiliza el principio de unión de proteína-colorante. Analytical Biochemistry 72: 248-254. 1976.
(2) Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ (noviembre de 1951). “Medición de proteínas con el reactivo de fenol Folin”. J. Biol. Chem . 193 (1): 265-75.
Pero luego, las enzimas son, después de todo, moléculas funcionales y sería mejor si estuvieran representadas en términos de función más que de estructura. 1 unidad de actividad enzimática se define como la cantidad de enzima que cataliza 1 umol de sustrato por minuto. La mayoría de las enzimas comerciales están disponibles con su concentración informada en unidades en lugar de concentración de proteínas.