¿Qué se necesita para mantener viva una célula madre en un laboratorio (excepto congelarla)?

El cultivo de células madre está bastante bien establecido ahora. Los vendedores tienen juegos completos de productos que se utilizan para apoyar el crecimiento y mantenimiento de células madre en el laboratorio [1]. Mantener vivas las células madre es solo la mitad de la batalla; también se desea mantenerlas como tal. Esto es generalmente más difícil cuanto menos diferenciadas están las células madre.

Voy a suponer que no está hablando de células madre más diferenciadas, específicas de los tejidos, como la piel, el intestino, la sangre o las células madre musculares. Las células madre pluripotentes (incluidas las embrionarias y las pluripotentes inducidas) son las células que pueden convertirse en cualquier tejido del cuerpo adulto. A las personas les gustan los PSC porque podrían usarse para regenerar esos tejidos.

La cultura PSC no difiere mucho de la cultura celular normal, pero es más exigente. Debido a que son menos especializados, no producen algunos factores de crecimiento y proteínas de matriz extracelular que necesitan para sobrevivir. (En el cuerpo, estos factores de supervivencia serían proporcionados por células diferenciadas cercanas en el nicho de células madre.) En el laboratorio, depende del investigador proporcionarlos, por ejemplo, cubriendo las placas de plástico con gelatina (o proteína similar). y proporcionar una “capa de alimentación” de células de soporte, más comúnmente fibroblastos embrionarios de ratón. (Se puede encontrar más información en el Manual PSC). El medio PSC también puede incluir inhibidores de vías de diferenciación para mantenerlos como células madre.

Las cosas en común con el cultivo celular de mamíferos regular incluyen:

• Guárdelos en una incubadora a temperatura corporal y concentración de CO2.
• No dejes que ninguna bacteria se caiga. ¡Aquí no hay un sistema inmune para combatirlos!
• No dejes que crezcan demasiado. Las células aplastadas se diferenciarán, se estresarán, dejarán de dividirse y otras cosas indeseables. Como puede ver en la línea de tiempo debajo, las células son “pasadas” (levantadas del plato y puestas en una nueva) para diluirlas.
• Alimentarlos medio (caldo nutriente). Las células madre tienden a necesitar alimentación con más frecuencia, por lo general todos los días, y los pases frecuentes debido a su alta tasa de proliferación. El siguiente cuadro contiene algunos productos para un “cronograma de alimentación sin fin de semana” para aquellas personas extrañas que no quieren trabajar los fines de semana:

• Si desea utilizar las células para terapias humanas, desea evitar el uso de productos de origen animal. Desafortunadamente, los animales son una fuente buena y abundante de factores de crecimiento y otras proteínas. Las formulaciones libres de animales se basan en proteínas humanas genéticamente modificadas (recombinantes) en su lugar ($$$).

Descargo de responsabilidad: no he trabajado con PSCs. He trabajado con una línea celular de ratón MSC [2] cuya cultura es tan fácil como el cultivo celular normal.

Notas a pie de página

[1] Cultivo de células madre

[2] El injerto subcutáneo de células madre mesenquimales de ratón D1 conduce a la formación de una estructura ósea