¿Cuáles son los errores más comunes (evitables) en la PCR?

A continuación se presentan algunos desafíos / errores que se encuentran con frecuencia al configurar una PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) Intenté enumerarlos en el orden en que podrían aparecer en un flujo de trabajo de expresión…
¿Cuáles son las ventajas / desventajas de Phusion vs Taq polimerasa en PCR?

Además de ser más rápido que Taq, Phusion también genera menos errores / kb en promedio, al menos, en comparación con una polimerasa Taq estándar (existen diversas variantes de alta fidelidad). Para seleccionar una polimerasa, la mayoría de…
¿Por qué la tinción de Golgi da como resultado un número relativamente pequeño de neuronas que se tiñen?

Un número limitado de neuronas se tiñen al azar. Solo las células individuales están teñidas, las adyacentes no. No hay forma de saber qué neuronas se mancharán de antemano. Hasta donde yo sé, no ha habido ningún intento…
¿Es posible hacer una ultracentrifugación de equilibrio de sedimentación solo para extraer una proteína deseada?

Es poco probable que su proteína se comporte de una manera única; en el mejor de los casos obtendrás algún nivel de enriquecimiento. ¿Qué tipo de análisis? Podría ejecutar una PÁGINA para ver la pureza. Probablemente, la prueba…
¿Cuál es el mejor buffer y procedimiento para usar para verificar si las mitocondrias in vitro están funcionando?

La pregunta puede escribirse con más detalle. Pero por ahora supongo que al funcionar, uno significa probar la actividad respiratoria. El siguiente es el procedimiento que se desarrolló en el laboratorio actual en el que trabajo y lo…
¿Qué es EDTA sangre entera?

EDTA es un aditivo en tubos que se utilizan para recolectar sangre. Estos tubos son generalmente lavanda, púrpura, rosa, gris o azul marino. Esto evita que la sangre se coagule, por lo que el análisis se puede realizar…
Si mi estándar de proteína (BSA) está en ug / ml y mi muestra está en mg, ¿qué unidad de medida de proteína debería usar? ¿Cómo puedo expresar mi proteína en tanto por ciento?

Bueno, hay 1000 microgramos (μg) en un miligramo (mg). Así que convertir entre los dos no debería ser difícil. De manera similar, calcular una concentración a partir de una masa y un volumen conocidos no debería representar un…
¿Hay alguna forma de cultivar E. Coli que no se pueda mover?

Estoy de acuerdo con @Matt Russel http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/… http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/… El efecto de las condiciones ambientales sobre la motilidad de Escherichia coli En estas publicaciones, vi que algunas condiciones pueden inhibir la síntesis de flagelos en E. coli (no su…
¿Cuál es el método más efectivo y eficiente de la síntesis moderna de ADN?

La respuesta corta: Oligo Arrays. ¿Qué es un oligo array? Es un chip de ADN con pedazos sintéticos de ADN monocatenario, también conocidos como oligos. Los arreglos Oligo funcionan como una impresora, solo que en lugar de imprimir…
¿Cuáles son los trucos de laboratorio más útiles, consejos y trucos para la biología molecular / bioquímica?

Haga una mezcla maestra de PCR en un lote grande (~ 50 ml) y una parte alícuota en porciones de 500 ul *. Congelar. Descongelar cuando sea necesario. Volver a congelar Se puede congelar / descongelar hasta ~…