¿Pueden las enzimas de restricción agregar residuos a su producto de clonación de genes?

Sí, dependiendo del sitio de reconocimiento de la enzima y cómo se ha diseñado la clonación. Por ejemplo, algunos enfoques de clonación aprovechan un ATG presente en una secuencia de reconocimiento de enzima de restricción, y usan este ATG como un codón de inicio apropiadamente posicionado en un promotor y una secuencia de unión a ribosoma. Entonces, un sitio NcoI (CCATGG) usaría este ATG como un codón de inicio, pero debido a que es seguido por una G, esto requiere la adición de dos nucleótidos después del sitio para mantener el producto del gen en el marco (asumiendo que en el gen estás clonación, el cuarto nucleótido ya no es un G). En otros casos, el diseño de clonación es tal que no se agregan residuos a la secuencia del gen en sí.

Las enzimas de restricción (enzima de restricción) son esencialmente ” tijeras moleculares”, cortan el ADN en sitios de reconocimiento específicos o casi específicos.

Hay tres tipos de enzimas de restricción:

Los científicos reconocen tres categorías de enzimas de restricción: tipo I, que reconocen secuencias de ADN específicas pero que se cortan en sitios aparentemente aleatorios que pueden estar tan alejados como 1,000 pares de bases del sitio de reconocimiento; tipo II, que reconoce y corta directamente dentro del sitio de reconocimiento; y tipo III, que reconocen secuencias específicas pero hacen su corte en una ubicación específica diferente que generalmente está dentro de aproximadamente 25 pares de bases del sitio de reconocimiento. EcoB y EcoK son enzimas de tipo I, mientras que HindII y HindIII son enzimas de tipo II.

Como originalmente postuló Arber, todas las enzimas de restricción sirven para la defensa contra virus invasores. Las bacterias protegen su ADN modificando sus propias secuencias de reconocimiento, usualmente añadiendo moléculas de metilo (CH3) a nucleótidos en las secuencias de reconocimiento y luego confiando en la capacidad de las enzimas de restricción para reconocer y escindir solo secuencias de reconocimiento no metiladas. Además, como sospecha Arber, los bacteriófagos que se han replicado previamente en una cepa bacteriana huésped particular y han sobrevivido se modifican de manera similar con nucleótidos marcados con metilo y, por lo tanto, se protegen de la escisión dentro de la misma cepa.

Fuente: Enzimas de restricción

Su pregunta es “¿Pueden las enzimas de restricción agregar residuos a su producto de clonación de genes?”

La respuesta es ; En la mayoría de los casos, NO, no añadirá ningún residuo al producto de clonación de genes, excepto en los casos descritos en la respuesta de Morgan Feeney.