Hay tres principales químicas de inmunoconjugación (al menos con las que estoy familiarizado):
- IgG (el tipo de anticuerpo que se usa más en inmunoquímica) tiene una serie de enlaces disulfuro, particularmente en las regiones bisagra. La reducción parcial de estos enlaces con un agente reductor suave como metabisulfito de sodio o TCEP o DTT libera estos residuos de cisteína para formar disulfuros con sulfhidrilos libres en moléculas conjugadas, o para actuar como nucleófilos en reacciones de sustitución, como con una n-etilmaleimida conjugado activado La química aquí es bastante simple, el inconveniente es que es fácil reducir en exceso la IgG y desnaturalizarla.
- Mi química preferida es oxidar los cis-dioles presentes en el resto carbohidrato a aldehídos con peryodato sódico, luego reaccionar con un conjugado modificado con hidrazida. Esta química es extremadamente eficiente, y debido a que el carbohidrato no es importante para la unión del objetivo IgG, corre poco riesgo de desnaturalizarlo.
- Probablemente, la química más común es activar los grupos carbonilo en el conjugado con n-hidroxisuccinimida (NHS) y permitir que reaccionen con aminas libres (lisina) en la IgG. La química es fácil, pero los rendimientos son variables y no específicos del sitio. Una cierta fracción de la IgG está inevitablemente inactivada.
