Western Blot implica electroforesis en gel. Este documento lo explicará en detalle: Western Blot: Técnica, teoría y solución de problemas
Básicamente, una mezcla de proteínas se aísla de células o tejidos. Puede usar una proteína purificada, pero esto generalmente se usa solo como control positivo. La mezcla se coloca en un gel que luego se coloca bajo corriente eléctrica. El gel separa las proteínas por tamaño y carga. Las proteínas en el gel se transfieren luego a un soporte sólido. El soporte se incuba con un anticuerpo específico para la proteína que le interesa (anticuerpo primario). Lave el anticuerpo libre. No se puede ver el anticuerpo primario, por lo tanto, se usa un anticuerpo contra el anticuerpo primario. Supongamos que el anticuerpo primario es una IgG monoclonal de ratón. El anticuerpo secundario suele ser un anticuerpo de cabra contra IgG de ratón. El anticuerpo secundario tiene marcadores en él para que pueda visualizarse. El anticuerpo secundario se visualiza luego. Eso significa que solo ves una banda en el soporte donde está la proteína de interés. La densidad de la banda te da una idea de la cantidad de proteína presente. A menudo se comparan diferentes condiciones de las células / tejidos para ver si la cantidad de proteínas ha aumentado o disminuido.
La inmunocitoquímica implica observar individuos (o grupos) de células enteras. La inmunocitoquímica se refiere a la inmunotinción en células sin matriz extracelular: células en cultivo de adherencia, células en cultivo en suspensión o células en un frotis. http://docs.abcam.com/pdf/protoc…
Básicamente, las células se “fijan” y luego la membrana se permeabiliza con detergente (para que entren los anticuerpos). La tinción del anticuerpo es básicamente la misma: un anticuerpo primario para la proteína de interés y un anticuerpo secundario con la señal de visualización. Muy a menudo, la visualización se realiza mediante un fluorocromo y la visualización implica microscopía fluorescente. Dependiendo de la óptica del microscopio disponible, ICC puede identificar qué células producen la proteína y / o la ubicación intracelular de la proteína.
También hay inmunohistoquímica, que es inmunotinción en secciones de tejido biológico. Inmunocitoquímica – Wikipedia