Ingeniería genética: ¿la fijación de etiquetas de reconocimiento como la etiqueta His, un epítopo particular o una proteína completa a una proteína de interés interfieren con el plegamiento de proteínas?

No hay una regla general para esto. Cada proteína tiene un patrón de plegamiento y un destino únicos (membrana celular, soluble) que hacen que sea imposible predecir si una etiqueta afectaría su actividad.

Te dirijo a la puerta de búsqueda para una discusión similar con referencias incrustadas: ¿afectará His-tag a la estructura o actividad de una proteína?

También encontré un artículo relevante en el que los autores observaron que para una proteína modelo expresada por linfocitos, la localización subcelular de la proteína de fusión con GFP era diferente a la de la proteína nativa, lo que sugiere que la célula usa un procesamiento intracelular diferente para segrega la proteína (La fusión de la proteína fluorescente verde al extremo C de la granulisina altera su localización intracelular en comparación con la molécula nativa)

Generalmente, estos tipos de estudios deben tomarse con un grano de sal, ya que existe tal biodiversidad de estructura y función de proteínas. Las lecciones aprendidas de un modelo de proteína pueden no aplicarse a todas las proteínas.

Depende de la proteína. La forma de la proteína determina la funcionalidad. Si el extremo c-terminal está enterrado en la proteína, es probable que interrumpa la forma y la funcionalidad. Pero hay muchas proteínas que tienen el extremo c-terminal en el exterior de la proteína, y en muchos de esos casos el epítopo o etiqueta no cambiará en gran medida su plegado o función. Cuando se agrega un epítopo, necesita compararlo con un control negativo donde no hay epítopo, para asegurarse de que no haya ningún fenotipo que muestre la interrupción de la funcionalidad de esa proteína.

La respuesta de Kyle es muy buena. Añadiré que la mayoría de las proteínas no tendrán su estructura alterada por la adición de una etiqueta. Los términos rara vez están enterrados y, por lo general, es posible etiquetar una proteína y verificar que tenga la misma estructura a través de un ensayo funcional o vinculante.