Como otros han insinuado, la respuesta depende de lo que le gustaría hacer con su proteína expresada. Es posible que desee expresar una proteína en las células y luego purificarla para su posterior estudio. Hay sistemas de expresión heterólogos que pueden lograr esto. También es posible que desee sobreexpresar una proteína en las células y medir lo que le sucede a las células de diversas maneras.
Para las proteínas de expresión para la purificación, Johnathon mencionó las células de E. coli BL21, que son útiles para expresar proteínas más pequeñas y menos complejas. Hice un gran trabajo como técnico de laboratorio que expresa la proteína calmodulina que tiene 150 aminoácidos de longitud. E. coli fue un gran sistema para producir cantidades masivas de este péptido.
Algunos de mis colegas que deseaban expresar los canales iónicos como proteínas transmembrana adoptaron un enfoque diferente. Utilizaron células de insectos o células de mamíferos, cultivadas en una incubadora de cultivo celular. Las células de insecto son agradables porque pueden crecer a granel con mayor facilidad que las células de mamíferos. Las líneas celulares de insectos comunes son SF9 y SF21, que se establecen a partir de Spodoptera frugiperda (polilla del gusano del otoño). Las líneas celulares Drosphila también están disponibles.
Hay muchas líneas celulares de mamíferos que se pueden usar para la expresión de proteínas, pero la más común de ellas son las líneas HEK293, con varias modificaciones para hacer que la expresión masiva de proteína sea más conveniente. La variante FT, vinculada a lo que sigue, usa el antígeno T grande SV40 y un sistema lentivirus para permitir la expresión masiva de proteína.
Campo de golf:
HEK293FT: línea celular 293FT – Thermo Fisher Scientific
HEK293T: 293T ATCC ® CRL-3216 ™ Homo sapiens riñón embrionario
Sf21
