Sugeriría insertar un sitio de segmentación justo antes, al agregar la etiqueta a su proteína de interés. Por ejemplo, un sitio de escisión de TEV. Una vez que haya lavado bien su columna de níquel, podría eluir la proteína con la proteasa TEV y matar dos pájaros de un tiro. Eluya su POI y elimine la etiqueta. Creo que TEV se usa con mayor frecuencia porque solo deja un solo residuo no nativo.
¿Cuál es la forma más sencilla de eliminar una etiqueta His?
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Si a la etiqueta His le sigue un sitio de escisión de la proteasa (el sitio más utilizado es la proteasa TEV), entonces puede escindir fácilmente la etiqueta con esa proteasa particular. Sin embargo, la división puede no ser del 100% en caso de que la etiqueta his y el sitio de escisión estén ocultos en la estructura de la proteína.
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