¿Cuál es un buen método para comparar los niveles de expresión de proteínas en dos muestras de células diferentes?

Esta no es mi área de especialización en absoluto, pero lo he hecho una o dos veces (pero no recientemente). Cuando lo hice, utilizamos DIGE (electroforesis en gel bidimensional con diferencia de fluorescencia) para hacerlo. Incluyo dos documentos…
Cómo mostrar la expresión de una proteína de membrana sin etiquetas

Supongo que siempre puedes observarlos en soluciones polares o soluciones no polares. Las proteínas de la membrana son anfipáticas, ya que, en un disolvente polar, el segmento hidrófobo se agregará, probablemente permanezca en la superficie del disolvente. Y…
¿Cómo podemos mantener la proteína estable / feliz en una solución durante la purificación?

Mantener una proteína estable en solución es maximizar su solubilidad. Por lo tanto, el entorno del buffer debe mantenerse de una manera que aumente la solubilidad de la proteína. Esto puede ser pH, temperatura, sal, proteínas chaperonas, etc.…
¿Qué técnica puedes usar para determinar la homogeneidad de la proteína en la solución?

Depende del tipo de homogeneidad de la que está hablando: La pureza de la proteína se puede analizar mediante un simple gel de SDS con tinción de plata La heterogeneidad en las modificaciones postraduccionales se puede analizar mediante…
¿Cómo difiere la fabricación de anticuerpos terapéuticos de los utilizados para la investigación?

Los anticuerpos de grado de investigación son realmente baratos, casi baratos en comparación con los anticuerpos terapéuticos. Básicamente, los anticuerpos de grado de uso exclusivo de investigación (RUO) son proteínas. Se producen a granel en biorreactores de mayor…
¿Qué deberías usar para limpiar viales de ADN?

Agua + detergente Luego 0,2 M de HCl para hidrolizar cualquier ADN que quede Luego 70% de etanol o acetona para enjuagar el HCl. Seque al aire el vial para eliminar el etanol o la acetona. Referencia: Reciclaje…
¿Cuál es el mejor medio para pruebas bioquímicas en microorganismos?

Los microbios son increíblemente diversos, particularmente con respecto a su bioquímica. La gran mayoría (99% es una estimación común) no se puede cultivar en el laboratorio. Pero los microbios de importancia clínica ( Streptococcus, Staphylococcus, Enterobacteriaceae, etc.) son…
¿Cómo se puede usar una pantalla de levadura para reconocer proteínas transmembrana plegadas correctamente como TCR?

Supongo que estás intentando diseñar TCR u otra proteína transmembrana mediante evolución dirigida en la visualización de la superficie de la levadura. Yeast es un sistema de visualización realmente agradable, ya que ofrece las modificaciones postraduccionales más complejas…
¿Cuáles son las ventajas de estudiar las vías metabólicas a nivel de una sola célula?

Las vías metabólicas de las células individuales son la base de la vida. Muchos de ellos también son comunes a toda la vida. Producción de energía (ciclo de Krebs, fosforilación oxidativa, transporte de combustible), metabolismo, apoptosis, fosforilación, metilación,…
Si usa una concentración más alta de la misma enzima conjugada, ¿esperaría ver los mismos resultados en un ELISA?

Supongo que por enzima conjugada se quiere decir el conjugado de anticuerpo primario (en ELISA directo) o el conjugado de anticuerpo secundario (en ELISA indirecto). Si aumenta la concentración del conjugado de anticuerpos, observará un aumento en las…