Hola..
Según los parámetros dados, la concentración de antígeno es la misma. Y estamos tratando de cuantificar estos antígenos por medio de la interacción proteína-proteína (antígeno, antisueros, anticuerpos, enzimas, todos son proteínas. ¿Verdad?)
Para el propósito de la detección, usamos la enzima (los antígenos se unen primero a la enzima, peroxidasa de rábano picante , por ejemplo) y luego la adición de un segundo sustrato permite la detección).
Por lo tanto, una mayor cantidad de enzima no puede alterar nada, ya que el número de antígenos es fijo, es decir, un número limitado de antígenos se unirá a un número limitado de enzimas. La aplicación de una mayor concentración enzimática aumentada (más cantidad de moléculas de enzima por volumen) no será de mucha utilidad debido al hecho de que los antígenos ya están saturados con enzimas y ya no quedan más anticuerpos para que se una el exceso de moléculas de enzima; un fenómeno, denominado Efecto de Saturación .
Y después del lavado, este mayor número de moléculas de enzimas libres se eliminará por lavado. Y después de la adición del segundo sustrato, obtendremos el mismo resultado.
Y para el registro, la aplicación del exceso de enzima da una curva hiperbólica ( n . ° de enzimas utilizadas frente a la gráfica de absorbancia ) debido a este efecto de saturación.
Fuente de la imagen: Google. Gracias.
Editar: el aumento en la absorbancia puede encontrarse solo debido a una unión no específica, lo que lleva a una interpretación engañosa. Gracias