La electroforesis en gel se usa para determinar el estado de la digestión de restricción , lo que significa la medida en que el ADN es cortado por la enzima endonucleasa de restricción. También se usa para el aislamiento de fragmentos de ADN deseados.
El principio de este método es que los fragmentos de ADN cargados negativamente se mueven hacia el cátodo con carga positiva a través de un gel de agar que actúa como un tamiz.
Entonces, primero, los fragmentos de ADN se llenan en los pocillos presentes en el gel y uno de los pocillos se llena con un ADN de referencia. El gel está hecho de agar agar y tiene poros a través de los cuales se mueven los fragmentos de ADN.
Ahora, dado que los fragmentos de ADN están cargados negativamente, se mueven hacia el cátodo con carga positiva. Los fragmentos más grandes se mueven más despacio que los fragmentos más pequeños.
En el siguiente paso, los fragmentos de ADN en el gel de agar se tiñen con bromuro de etidio . Cuando este gel teñido con bromuro de etidio se expone a radiaciones UV, los fragmentos de ADN aparecen de color naranja.
El fragmento de ADN deseado se corta luego junto con el gel de agar. El gel de agar luego se digiere con las enzimas apropiadas y finalmente se aisla el fragmento de ADN deseado.
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