Teniendo en cuenta que eres un principiante en esto-
Absorbancia (A) = a (lambda) * b * c
donde a (lambda) es el es un coeficiente de absortividad dependiente de la longitud de onda, b es la longitud del camino, y, y c es la concentración del analito.
Cuando se trabaja en unidades de concentración de molaridad, la ley de Beer-Lambert se escribe como sigue:
A = épsilon * b * c
donde épsilon es el coeficiente de absortividad molar dependiente de la longitud de onda con unidades de M / cm.a
¿Qué pasaría si todo tu ADN desnaturalizado al mismo tiempo?
Nuestro ADN produce proteínas ¿por qué necesitamos comer proteínas?
¿Cuál es la función de las proteínas de unión a ADN monocatenarias?
¿Qué tan cerca estamos de perfeccionar la edición de genes y ADN?
¿Por qué es más fácil desnaturalizar el ADN que las proteínas?
Cuanto mayor sea la concentración, mayor será la absorción.
Entonces, tienes una solución que tiene tu ADN / ARN / proteína, en resumen, tu analito (esta es la sustancia cuya concentración necesitas saber)
Ahora debes saber sobre el fenómeno de la absorción en el que si paso rayos UV a través de mi solución que contiene ADN, este ADN absorberá parte de la luz que pasa a través de él.
El ADN tiene su máximo de absorción a 260 nm, es decir, absorberá la mayor parte de la luz que pasa a través de la misma a una longitud de onda de 260 nm, ahora, ¿cómo obtenemos solo esta luz de longitud de onda?
Esto se hace por la presencia de filtros en el espectrofotómetro que selectivamente permitirán solo esa longitud de onda particular, ahora esta luz tiene que venir de algún lugar ¿cierto?
Entonces, esta fuente de luz de una bombilla UV generalmente está en el espectrofotómetro que emitirá ondas de luz en el rango de UV (10 nm a 400 nm)
Entonces las partes de un espectrofotómetro son:
fuente de luz, lente, monocromático (que solo permitirá la longitud de onda de mi elección) puede ser un prisma o un rallador, luego la cubeta con mi muestra (la cubeta es generalmente un recipiente pequeño de vidrio o cuarzo que contiene mi solución) y luego hay un detector en forma de una fotocélula y finalmente una pantalla.
Entonces la luz emanará desde mi fuente de paso a través de la lente y se filtrará a través del monocromador / rallador que permitirá que pase la longitud de onda de 260 nm y luego cuando la luz pase a través de la muestra en la cubeta absorberá esta luz.
Ahora, como la absorbancia es directamente proporcional a mi concentración de analito: más alta será mi concentración de analito.
Al variar la concentración de analito que varía desde el blanco hasta quizás 10 ng / ul, podemos trazar un gráfico estándar y luego se puede deducir el valor desconocido a partir de eso.
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