Entonces hay dos terminologías para explicar-
- Enriquecimiento celular, y
- Reportero promotor
Ambos son fáciles de entender.
1. Enriquecimiento celular: tenemos que realizar el enriquecimiento celular cuando se trata de una mezcla de células y queremos aislar una población relativamente pura de un tipo particular de células (por ejemplo, células madre) y eliminar otros tipos de células (por ejemplo, no Células madre). Hay muchas maneras de hacer esto. Un método común es separar las células basadas en marcadores de superficie. Digamos que sabemos que las células madre expresan una cierta proteína en sus superficies, mientras que esa proteína no se expresa en células no madre. Tales proteínas se llaman marcadores de superficie celular. Luego obtenemos un anticuerpo que se une específicamente a esa proteína marcadora y también tiene el anticuerpo etiquetado con un material magnético. Ahora tenemos un anticuerpo marcado magnéticamente unido a la proteína marcadora, y la proteína marcadora, como sabemos, está presente solo en las células madre, por lo que efectivamente los anticuerpos magnéticos están presentes solo en las células madre. Ahora pasa la solución de células mixtas a través de un campo magnético. Las células con anticuerpos magnéticos (es decir, las células madre) se retendrán en el campo magnético y el resto de las células (células no madre) se drenarán. Entonces ahora tiene poblaciones de células madre puras separadas de una población mixta. Esta técnica de separación magnética se llama MACS (clasificación celular activada magnéticamente).
Ahora, la descripción anterior da la impresión de que tiene una población de células madre absolutamente pura cosechada por el método de separación. Eso no es verdad. Por lo general, no hay marcadores de superficie perfectos, que estén presentes exclusivamente en un solo tipo de célula. Los marcadores de células madre, por ejemplo, también están presentes en algunas células no madre. Así que terminas obteniendo una población que tiene un mayor número de células madre, pero también un número menor de células no madre, es decir, no tienes una población pura de células madre, sino que tienes una población que está enriquecida con células madre. . Por lo tanto, el nombre de enriquecimiento celular.
2. Reportero promotor: Ciertos genes son activos en ciertos tipos de células pero no en otros. En su mayoría, un promotor determina si los genes están expresados o no. Si un promotor está activo, el gen se expresa, si no, el gen no se expresa. Entonces, si solo tomas la secuencia promotora de un determinado gen y lo adjuntas aguas arriba de una GFP (Proteína Fluorescente Verde), y la introduces en las células, solo las células en las que se expresa un gen particular brillarán en verde. Si el gen resulta ser un gen marcador, digamos que para una célula madre, entonces sabes que estás mirando las células madre. Básicamente, GFP le informa sobre la actividad del promotor. La técnica FACS (clasificación de células activadas por fluorescencia) se usa para separar las células en función de la fluorescencia. Por lo tanto, puede combinar reportero de promotor con FACS para separar ciertos tipos de células.
PD: Ambos conceptos anteriores han sido extremadamente simplificados por el bien de la comprensión. Estas son técnicas comúnmente utilizadas en biología celular y la mayoría de los libros de texto de biología celular tienen una buena descripción de estas técnicas, que deben consultarse para una mayor comprensión.
