¿Por qué el gel de agarosa no se usa para proteínas?

Las proteínas son demasiado pequeñas para obtener una resolución decente. Al menos, no a una concentración razonable para la agarosa.

Una proteína bastante típica es ~ 50 kDa. Esto es igual a un fragmento de ADN de 75-100 pares de bases. Incluso una proteína grande a ~ 250 kDa tiene el tamaño de un fragmento de ADN de 400 pares de bases. Cuando uso geles de agarosa utilizo esta escalera (2-Log DNA Ladder (0.1-10.0 kb)).

Cuando uso un gel de proteína, uso esta escalera (Precision Plus Protein ™ All Blue Prestained Protein Standards # 1610373)

La banda más grande absoluta en la escala de proteínas alcanza la banda de 0.4 kilobases de la escala de ADN. La agarosa simplemente no es una buena opción para la mayoría de las proteínas.

Los geles de agarosa tienen tamaños de poro variables, pero muy grandes, esto causa que la mayoría de las proteínas pequeñas se resuelvan mal, pero las proteínas grandes (más de 150 kDa) también se pueden obtener con agarosa ya que son lo suficientemente grandes.

La poliacrilamida se produce con una reacción química y el tamaño de los poros suele ser muy uniforme y pequeño, lo que los hace ideales para cualquier cosa, desde oligopéptidos hasta proteínas más grandes.

Solo quiero agregar una cosa más:

Desde su estructura 3D, para llevar a cabo la electroforesis de proteínas, se utiliza SDS-Page. Dado que SDS puede desnaturalizar las proteínas haciéndolas perder su estructura terciaria, de lo contrario (independientemente de su tamaño) se quedarían atrapadas en el gel y se puede sobreestimar su tamaño.