Un método para las transferencias Western que reconocen epítopes lineales es usar una tinción reversible. Las manchas de zinc usan una solución coloidal de sales insolubles de zinc-imidazol. [1] [2] Las sales dispersan la luz y convierten el gel en un blanco lechoso opaco. [3] El zinc se une a SDS. La unión de SDS desplaza el ion imidazol, disolviendo el precipitado de dispersión de la luz.
El resultado es una imagen negativa: clara donde está la proteína y blanca en todas partes, que generalmente se fotografía contra un fondo negro para que las bandas de proteínas claras sean más fáciles de ver. [4] Las manchas de zinc se eliminan fácilmente lavándolas con un fuerte quelante como EDTA.
Tenga en cuenta que el método depende de SDS. No funcionará si el anticuerpo reconoce un epítopo conformacional plegado.
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Notas a pie de página
[1] Detección de biomoléculas en geles de electroforesis con sales de imidazol y zinc II: una década de investigación
Cuando una planta crece a partir de una semilla, ¿de dónde proviene la mayor parte de su masa?
¿Qué tan difícil es hacer un modelo de ratón para las pruebas genéticas?
[2] https://www.researchgate.net/pub…
[3] http://onlinelibrary.wiley.com/d…
[4] Uso de una placa de luz retroiluminada para mejorar la visualización de geles revertidos con imidazol-zinc