¿Por qué algunos estudios utilizan ensayos de recuperación de CMV para verificar la actividad funcional in vitro de los inhibidores de los puntos de control?

Respuesta corta : el CMV (citomegalovirus – Wikipedia) infecta a la mayoría de los seres humanos en algún momento de su vida. Las respuestas de células T anti-CMV humanas son por lo tanto una herramienta conveniente in vitro específica de antígeno para evaluar la capacidad funcional del mAb inhibidor de punto de control (anticuerpo monoclonal), específicamente, si funcionan como deberían y por lo tanto, podrían revertir el cáncer específico humano antígeno específico T inhibición celular

Respuesta un poco más larga

Breve explicación para la justificación de los inhibidores del punto de control

Las células T activadas expresan la molécula PD-1 en su superficie. La unión de células T PD-1 a PD-L1 expresada por otras células envía una señal inhibidora a la célula T. Dichas células T detienen la proliferación y secreción de citocinas, lo que significa que la unión de PD-1-PD-L1 inhibe esencialmente la función efectora de células T.

Muchas células cancerosas expresan altamente PD-L1. Los mAbs inhibidores del punto de control que se dirigen selectivamente a las moléculas PD-1 (Nivolumab – Wikipedia y Pembrolizumab – Wikipedia) y PD – L1 (Atezolizumab – Wikipedia) previenen la interacción PD – 1 – PD – L1. Esto es similar a liberar los frenos de las células T previamente activadas y actualmente inhibidas.

Inhibidores del punto de control utilizados en la inmunoterapia contra el cáncer: existen células T implicadas en el cáncer que implican antígeno cancerígeno, pero están inhibidas por moléculas como PD-1 y CTLA-4 y que al bloquearlas libera el potencial completo de destrucción tumoral de tales células T. Los inhibidores de Checkpoint también desbloquean otras células T, lo que significa que también es posible la autoinmunidad y otras patologías de los tejidos.

Ensayo de retirada de CMV para evaluar la capacidad funcional de los mAb inhibidores de punto de control

Un mAb inhibidor de punto de control tal como anti-PD-1 Nivolumab puede unirse a PD-1 expresado por cualquier célula T. ¿Cómo evaluar si tal unión efectivamente levantó los frenos de esa célula T como debería? Conocer la especificidad antigénica de una célula T hace que sea pan comido evaluar los cambios en su capacidad de respuesta. Por ejemplo, en inmunología básica, a menudo los experimentos se realizan con ratones transgénicos TCR – Wikipedia modificados genéticamente que tienen células T con una única especificidad antigénica conocida , es decir, monoclonal. La especificidad del péptido antigénico de todas las células T en dicho ratón es la misma. Simplemente cultive dichas células T con APC (célula presentadora de antígeno – Wikipedia) pulsadas con el péptido antigénico para el que son específicas en presencia o ausencia de un mAb inhibidor de punto de control.

Obviamente, esto está lejos de ser factible para evaluar las respuestas de células T humanas. ¿Qué tipo de antígeno podría utilizarse para evaluar las alteraciones funcionales en la respuesta de las células T humanas? Esto es especialmente un problema cuando se usan mAbs inhibidores de puntos de control en la inmunoterapia del cáncer, donde los antígenos de células T específicos del cáncer a menudo permanecen desconocidos. ¿Cómo confirmar la capacidad funcional de los mAb inhibidores del punto de control, confirmar que un nuevo lote puede levantar los frenos de las células T previamente activadas pero actualmente inhibidas como debería? Ahí es donde entra en escena la estimulación in vitro no específica de antígeno (reacción linfocítica mixta – Wikipedia), Superantigen – Wikipedia SEB (enterotoxina tipo B – Wikipedia) y el ensayo de recuperación de CMV específico de antígeno.

CMV

• Infecta crónicamente a la mayoría de los seres humanos en algún momento de su vida (1).
• Estimada ~ 60% y ~ 90% de prevalencia en los Estados Unidos en aquellos> / = 6 y> / = 80 años de edad, respectivamente, de 1988 a 1994 (2).
• Produce respuestas inmunitarias de células T fuertes y se conoce mucho acerca de las características de la inmunidad anti-CMV humana efectiva (3).
• Por ejemplo, la proteína pp65 de CMV es un objetivo principal de las respuestas de células T CD4 y CD8 humanas (4, 5, 6, 7, 8).

Tales características hacen que la evaluación de los cambios en las respuestas de las células T anti-CMV humanas sea una herramienta útil para controlar la capacidad funcional de los mAb inhibidores de punto de control. Vea un ejemplo de dicha evaluación a continuación de 9.

Bibliografía

1. La respuesta de Tirumalai Kamala a ¿Qué sabemos sobre la función de los virus en el microbioma?

2. Staras, Stephanie AS, et al. “Seroprevalencia de la infección por citomegalovirus en los Estados Unidos, 1988-1994”. Clinical Infectious Diseases 43.9 (2006): 1143-1151. https://www.researchgate.net/pro…

3. Gamadia, Laila E., y col. “Respuestas inmunes primarias al CMV humano: un papel crítico para las células T CD4 + productoras de IFN-γ en la protección contra la enfermedad por CMV”. Blood 101.7 (2003): 2686 – 2692. https://www.researchgate.net/pro…

4. Grefte, JMM, y col. “La proteína de matriz inferior pp65 es el principal antígeno viral presente en los leucocitos de sangre periférica durante una infección activa por citomegalovirus”. Revista de virología general 73.11 (1992): 2923-2932.

5. Khattab, Barbara Anna-Maria, et al. “Tres epítopos de células T dentro de los 265 aminoácidos C-terminales de la proteína de la matriz pp65 del citomegalovirus humano reconocido por los linfocitos humanos”. Revista de virología médica 52.1 (1997): 68-76.

6. Gyulai, Zsofia, y col. “Las respuestas de los linfocitos T citotóxicos (CTL) al citomegalovirus humano pp65, IE1-Exon4, gB, pp150 y pp28 en individuos sanos: reevaluación de la prevalencia de CTL específicos de IE1”. Journal of Infectious Diseases 181.5 (2000): 1537-1546. https://www.researchgate.net/pro…

7. Gibson, Laura, y col. “Las proteínas del citomegalovirus humano pp65 y la proteína 1 temprana inmediata son objetivos comunes para las respuestas de células T CD8 + en niños con infección por citomegalovirus humano congénito o postnatal”. The Journal of Immunology 172.4 (2004): 2256-2264. https://www.researchgate.net/pro…

8. Sylwester, Andrew W., y col. “Las células T CD4 + y CD8 + específicas dirigidas específicamente contra citomegalovirus humanos dominan los compartimentos de memoria de los sujetos expuestos”. Journal of Experimental Medicine 202.5 (2005): 673-685. https: //pdfs.semanticscholar.org…

9. Wang, Changyu, et al. “Caracterización in vitro del anticuerpo anti-PD-1 nivolumab, BMS-936558, y toxicología in vivo en primates no humanos”. Cancer immunology research 2.9 (2014): 846-856. http: //cancerimmunolres.aacrjour…

Gracias por la R2A, Sarah Whelan.