Idealmente, la cantidad de fijador debe ser de 20 a 30 veces el volumen de la muestra. Una vez que el paraformaldehído se ha entrecruzado con proteínas y lípidos insaturados fijos, cualquier exceso de paraformadehído permanecerá sin reaccionar.
Sin embargo, la fijación excesiva puede dar como resultado una autofluorescencia excesiva y volver irrecuperables algunos antígenos.
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