Esto es lo que hago más frecuentemente para mi investigación.
La mayoría de las moléculas de anticuerpos tienen múltiples grupos amina (-NH2) en su estructura molecular. Estas son aminas extra, deseablemente en la región Fc que pueden aprovecharse para reaccionar con fármacos / nanopartículas / radionucleidos, etc., sin interferir con la actividad del anticuerpo que reside en la región Fab.
Hay varias técnicas de bioconjugación que se pueden emplear.
Un enfoque es usar estas aminas para reaccionar con un enlazador de manera que un extremo del enlazador se una al anticuerpo y el otro se una al fármaco de interés. El fármaco en sí tiene amina o tiol u otros grupos funcionales que pueden reaccionar con el otro lado del engarce. De lo contrario, se puede funcionalizar principalmente sin alterar su actividad.
Esta imagen, tomada de google, hace un buen trabajo al describir lo que quiero decir.
Si miras detenidamente, el enlazador (tioéter) está formando un enlace amida con el anticuerpo (Trastuzumab). Esto sucede porque el tioéter tiene un grupo -COOH en el extremo que reaccionó con el grupo -NH2 en Trastuzumab.
El otro extremo está conjugado con el medicamento DM1.
Para unir un liposoma u otra nanopartícula, el procedimiento es similar. En tal caso, necesitaría funcionalizar su nanopartícula con los ligandos químicos apropiados para que puedan interactuar con el enlazador. Todas las partes de este conjugado son importantes y deben seleccionarse cuidadosamente, especialmente el enlazador.
Personalmente, cuanto más voluminosa sea la cantidad que deseo unir al anticuerpo, más tiempo mantendré mi enlazador para evitar cualquier obstáculo estérico o cualquier interferencia en la reacción del anticuerpo con su receptor. Además, el tipo de vinculador que seleccione depende de su necesidad. ¿Quieres que el medicamento sea lanzado en el sitio? Encuentre un enlazador sensible a estímulos que se escinde bajo condiciones controladas.
Algunos ejemplos de ligadores utilizados frecuentemente: polietilenglicol (PEG) de diversos tamaños, biotina-estreptavidina o agentes de acoplamiento TCO-Tz, etc.
Para unir un radionúclido, necesita un agente quelante. Este agente quelante tiene un grupo funcional que puede unirse a aminas extra u otros grupos en el anticuerpo. Una vez que tenga el complejo quelante de anticuerpos, puede radiomarcarlo con un núclido en condiciones específicas, que varían con cada nucleido.
Espero que esto ayude.
