Las bacterias pueden producir glicoproteínas (no conozco el mecanismo de cómo las bacterias glicosilan sus proteínas, pero sí sé que existen).
De todos modos, el uso de bacteriófagos para producir anticuerpos funciona así:
1) Material de partida: ADN del bazo (el bazo es un órgano inmunitario denso con muchas células B que se han reordenado del receptor de células B, particularmente en la región variable (región V, véase la Fig. 1) de los genes de inmunoglobulina).
Figura 1: Estructura de un anticuerpo. La región variable es el bit importante para el reconocimiento de antígenos. Fuente de la imagen http://www.seekbio.com/biotech/I…
2) Usando cebadores para secuencias consenso de las regiones variables de estos genes de inmunoglobulinas, puede amplificar utilizando PCR para las diversas regiones V, por lo que tendrá ahora un stock de genes de inmunoglobulina de la región V que puede usar para clonar en bacteriófagos en tales regiones. una forma en que habrá una proteína de fusión de la región V de una inmunoglobulina con una proteína de cubierta de bacteriófago (de ahí el nombre “presentación en fago”).
3) Luego amplifica estos bacteriófagos infectando bacterias, clonando así para una población aleatoria de regiones V (= biblioteca de presentación de fagos).
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4) Con esta población aleatoria de bacteriófagos que expresan la región V, puede seleccionar una región V deseada que exprese el bacteriófago mediante la unión del bacteriófago a una superficie que ha sido revestida con el antígeno de interés.
5) Todos los bacteriófagos irrelevantes permanecerían sin unir y, por lo tanto, se pueden eliminar por lavado. Su bacteriófago unido puede entonces recuperarse y multiplicarse aún más en bacterias, esta vez amplificando particularmente para una población de bacteriófagos que puede unirse al antígeno.
6) Infecta las bacterias nuevamente, esta vez con esta población de bacteriófagos que son específicos para el antígeno de interés.
7) Repite el proceso de infección de bacterias a múltiples bacteriófagos y selecciona con el antígeno de interés durante unos pocos ciclos y terminarás con una población de bacteriófagos que son específicos para el antígeno y también de una alta afinidad por el antígeno.
8) El ADN de estos fagos puede recuperarse y reconstruirse antes de transfectarse en una línea celular como hibridomas para convertirse esencialmente en una fábrica que bombea anticuerpos.
La figura 2 a continuación resume un poco los pasos mencionados anteriormente.
Figura 2: Pasos para la selección de visualización en fagos de las regiones V de interés y la introducción en una línea celular. Fuente de imagen Phage Display | ModiQuest Research
Esta es realmente una versión resumida de todo el proceso, realmente hay toneladas de recursos para una versión más actualizada de esta tecnología. Feliz lectura y aprendizaje.
