Deberá conocer la absortividad molar del sustrato y el producto. La diferencia entre las absorcividades molares le dará el cambio integrado en la concentración como una función del tiempo.
Para ejecutar el experimento, lo más probable es que inicie agregando sustrato y controle el cambio de absorción. El enfoque estándar sería usar los primeros puntos para calcular la pendiente para darle un cambio en la concentración del sustrato o del producto por unidad de tiempo. Esto se llama tasa inicial. Piénselo en términos de la siguiente ley de velocidad diferencial.
v = -d [sustrato] / dt = d [producto] / dt = k2 [prot] [sustrato]
Estás midiendo v en el tiempo cero.
Yo personalmente ajustaría los datos a la ley de tasas integrada y usaría los parámetros para obtener v en el tiempo cero. Bueno no. Yo usaría el modelo de Michaelis Menton (o cualquiera que sea la corrección apropiada) para obtener Km y vmax. La única razón para no usar Michaelis Menton es si no puede usar múltiples concentraciones de sustrato para su ensayo. (O si se sabe que la enzima no sigue el modelo de Michaelis Menton.) Programaría un ajuste global para extraer los parámetros auotomáticamente de un conjunto estándar de curvas de cinética. Por lo tanto, incluso si estuviese haciendo una gran cantidad de estos ensayos, dado que la adaptación podría automatizarse, la cantidad total de trabajo no sería significativamente más que su idea propuesta de solo medir las tasas iniciales.
