Así que he intentado pensar en esto de todos modos. Inicialmente pensé, tienes razón: tus hallazgos no tienen sentido. Aumentar la concentración de sustrato debería aumentar la CI50. Como IC50 es una medida de la función de unión, para evitar una mayor unión resultante de un sustrato superior, necesitaría más inhibidor. Y esto es verdad … en la mayoría de los casos.
He agregado una página de un libro de texto de Biochem (es un poco viejo, lo sé) que muestra la ecuación de Cheng-Prusoff con la relación entre IC50, [E] (concentración de enzima), [S] (concentración de sustrato), K i (constante de inhibición) y K m (constante de Michaelis Menten).
Mire la inhibición competitiva. A medida que aumenta [S], la Ki aparente también aumenta. Y cuando Ki aparente aumenta, también lo hace IC50 .
Ahora mira Inhibición no competitiva. A medida que aumenta [S], realmente disminuye la Ki aparente . Y a medida que Ki disminuye, también lo hace IC50 .
Si ve que su IC50 disminuye a medida que [S] aumenta, entonces es probable que esté presenciando Inhibición no competitiva. Inhibición no competitiva es cuando el inhibidor se une directamente al complejo Enzima-Sustrato. La mayoría de los inhibidores se unen a la enzima y hacen que cambie de forma (inhibición no competitiva) o se unen al sitio activo de la enzima y bloquean el sustrato (inhibición competitiva).
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Por último, podría haber otra forma de que la concentración de sustrato afecte al IC50. Es posible que su sustrato pueda afectar la actividad del inhibidor o incluso la actividad de la enzima. Si su sustrato es ligeramente ácido, aumentar su concentración disminuiría el pH a su alrededor. Y dependiendo de su enzima y su inhibidor, una disminución en el pH podría aumentar la actividad del inhibidor y disminuir la actividad de la enzima. Esto también daría como resultado una disminución general de IC50 , aunque, ciertamente, tendría que ser un cambio muy potente.
Espero que tenga sentido …
