¿Cómo desamidar los residuos de glutamina y asparagina en una proteína? ¿Cómo puedo dejar la proteína intacta?

Si recuerdo bien, la desamidación se produce con un ácido leve sin afectar la cadena principal de la proteína.

La composición total de la proteína afectará a la desamidación (efectos del entorno local)

Ver: determinantes de secuencia y estructura de la desamidación no enzimática de residuos de asparagina y glutamina en proteínas.

Protein Eng Des Sel (1991) 4 (3): 283 – 294.

DOI:

https://doi.org/10.1093/protein/…

Tratar con glutaminasa y asparaginasa. Estos se pueden comprar en empresas de biotecnología. O clonar el gen de su proteína si le interesa y mutar los codones gln / asn a los codones glu / asp. Utilicé el método primario superpuesto de mutagénesis dirigida al sitio, pero probablemente hay mejores métodos ahora, y si puedes pagarlo, puedes comprar el gen como un oligo (~ $ 100 por un oligo de 500 pb de IDT la última vez que revisé )

La respuesta anterior es correcta. No puedes hacerlo sin destruirlo.

No estaras disponible para. La hidrólisis del grupo guanina requiere condiciones que hidrolicen la proteína.