Cómo analizar la secuencia de aminoácidos completa o completa de una proteína en particular

Supongo que te refieres a cómo obtienes la secuencia. Esa respuesta ha cambiado a lo largo de los años: durante un tiempo se “cortó” la proteína en fragmentos y se secuenciaron los fragmentos utilizando Edman Degradation. Usando varios trucos, podría averiguar cómo los fragmentos volvieron a estar juntos y así obtener la secuencia completa. Luego se hizo mucho más barato y más rápido secuenciar el ADN en lugar de la proteína, por lo que aún usaría la Degradación de Edman para obtener una secuencia corta, y luego usar esa secuencia para encontrar el gen que codifica la proteína y luego secuenciar el ADN para el gen completo aprendiendo así la secuencia de aminoácidos también.

En la actualidad, a tantos organismos se les ha secuenciado genomas completos para que puedas utilizar un enfoque bioinformático. Con BLASTP o algo similar, puedes básicamente “buscar” y encontrar la secuencia de cualquier proteína en cualquier organismo que haya realizado su genoma.

Me doy cuenta de que también podría querer decir “analizar” como al deducir estructuras secundarias y terciarias. Esa es una historia interesante también, pero no tiene tiempo ahora para entrar en ella.

Probablemente algún tipo de espectrometría de masas. Por ejemplo, una vez quise determinar la secuencia de una banda de proteína en un gel PAGE. Corté la banda, digerí con tripsina e hice la especificación masiva MALDI. Esta técnica proporciona fragmentos de péptidos que pueden usarse para la identificación de proteínas en BLAST.