¿Puedo evaluar la desnaturalización de proteínas a bajas concentraciones por calorimetría?

Un calorímetro de barrido nano diferencial (nanoDSC) tiene una sensibilidad de alrededor de 10 microgramos de proteína. Para una lisozima de proteínas de 15000 MW, esta sensibilidad se traduce en una concentración de 0,2 μM en un volumen de 0,3 ml. Por lo tanto, DSC es alrededor de 10 veces más sensible * que el estudio de la desnaturalización por dicroísmo circular pero alrededor de cuatro veces más lento (el equilibrio térmico debe ser más exacto en DSC que en los experimentos de dicroísmo circular por lo que la rampa de temperatura es más lenta). Un experimento basado en fluorescencia que se basa en la unión a elementos hidrófobos expuestos (experimento de cambio de estabilidad térmica SyproOrange) será algo más sensible, más rápido y puede realizarse en paralelo en una placa de 96 pocillos.

* Depende del instrumento y la proteína estudiada: el número citado es para el NanoDSC y la lisozima. La sensibilidad de los modelos de instrumentos más antiguos se reduce en gran medida.

http://www.tainstruments.com/pdf…

Medición de la estabilidad proteica y la desnaturalización de proteínas en células usando calorimetría de barrido diferencial

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/…