A lo largo de los años, se han desarrollado una gran cantidad de métodos para estudiar las interacciones proteína-proteína, que incluyen Y2H (híbrido de levadura 2), TAP (purificación de afinidad en tándem), Co-IP (Coinmunoprecipitación), ensayos de pull-down, etc. enfoques tiene sus propias fortalezas y debilidades, especialmente con respecto a la sensibilidad y especificidad del método. Aquí está el enlace de visión general de los métodos para la detección y el análisis de las interacciones proteína-proteína, puede ayudar.
Entre estas técnicas, la interferometría de biocapa (BLI), una técnica óptica bien establecida y sin etiquetas, parece ser la técnica más prometedora para estudiar las interacciones biomoleculares.
En BLI, la punta de una sonda de fibra óptica está recubierta con ligando y actúa como biosensor. Esa punta luego se sumerge en una solución de analito, en el pozo de una placa de 96 o 384 pocillos. Para leer el ensayo, la luz blanca se dirige a lo largo de la fibra. La interferencia entre la luz que se refleja en la referencia y las superficies inmovilizadas de la punta crea un patrón distintivo de luz que regresa a la fibra. A medida que las moléculas se unen a la superficie del sensor inmovilizado, ese patrón cambia en proporción al grado de unión, proporcionando información detallada sobre la cinética de asociación y disociación de las moléculas de ambas moléculas, así como la constante de afinidad para la interacción de proteínas (ka, kd y Kd).
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